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高效液相色譜系統中氣泡對檢測的影響及其解決方法

在我們進行液相色譜分析時,有時會遇到這樣一個問題:系統的流路中存在氣泡。

由于氣泡的存在,會造成色譜圖上出現尖銳的噪聲峰,嚴重時會造成分析靈敏度下降;氣泡變大進入流路或色譜柱時會使流動相的流速變慢或不穩定,使基線起伏。

造成上述現象的主要原因有三條:

1.是流動相溶液中往往因溶解有氧氣或混入了空氣而形成氣泡;

2.是系統開始工作時未能將流路中的空氣驅趕干凈;

3.是在注入樣品時不注意混入了空氣。

為了避免這類問題的出現,液相色譜實際分析過程中必須重視:

一、對流動相進行脫氣處理,常用的脫氣方法有以下幾種:

1.吹氦脫氣法

使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣,在0.1Mpa壓力下,以約60ml/min流速通入流動相10-15min以驅除溶解的氣體。此法使用于所有的溶劑,脫氣效果較好,但在國內因氦氣價格較貴,本法使用較少;

2.加熱回流法

此法的脫氣效果較好;

3.抽真空脫氣法

此時可使用微型真空泵,降壓至0.05-0.07MPa即可除去溶解的氣體。顯然使用水泵連接抽濾瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成過濾機械雜質和脫氣的雙重任務。由于抽真空會引起混合溶劑組成的變化,故此法適用于單一溶劑體系脫氣。對多元溶劑體系應預先脫氣后再進行混合,以保證混合后的比例不變。

4.超聲波脫氣法

它是目前實驗室使用最廣泛的脫氣方法,將配制好的流動相連同容器一起放入超聲波水漕中脫氣10-20min即可。該方法操作簡便,基本能滿足日常分析的要求。

5.在線真空脫氣法

把真空脫氣裝置串聯到儲液系統中,并結合膜過濾器,實現了流動相在進入輸液泵前的連續真空脫氣。此法的脫氣效果明顯優于上述幾種方法,并適用于多元溶劑體系。

二、在液相色譜系統開始工作前,可以用注射器連接恒流泵的排空閥,抽入流動相,將流路中的空氣驅趕干凈。

三、在注入樣品前注意排出樣品注射器中的空氣。

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