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HPLC的流動相常見的脫氣方法有哪些?如何避免氣泡產生?

   HPLC的流動相常見的脫氣方法有以下幾種:

1超聲波脫氣,配好的溶液超聲波脫氣10-30分鐘,可除去部分的氣體,脫氣效率在80%左右,注意流動相溫度會上升,溶劑會揮發,混合溶劑的比例會發生變化。

2真空脫氣,效果比超聲波好,要注意不同溶劑的揮發對流動相組成的影響。這里可以用真空泵也可以用水泵,純有機溶劑對真空泵有損壞作用。

3在線脫氣機,使用方便,效果與氦氣差不多,首次投入比較大。

4在線脫氣裝置,用氦氣,脫氣效果最好,耗材成本高。

    如何避免氣泡的產生,可以從以下幾個方面來考慮。

1將確定的幾種流動相混合,用合適的方法脫氣,適合單泵體系的分析,這種體系要求比較低,脫氣不完全影響也不是很大,有條件在檢測器出口加一個反壓管或反壓柱。

2如果要梯度分析,或者幾個流路的等度分析,對于低壓混合的泵,建議先單獨各自脫氣,如有可能在檢測器出口接一個反壓柱,基本可避免氣泡的產生。當然,如果有在線脫氣機,則容易的多,不事先脫氣,大部分時間是沒問題的,事先脫氣效果更好。如果是高壓混合泵,產生氣泡的幾率比較低,在檢測器出口接一個反壓柱,一般不脫氣也沒問題;如果流動相再脫氣,極少再出現氣泡。

3還可以這樣考慮,例如純乙腈與純水混合時容易產生氣泡,尤其做梯度的時候。最好不用純乙腈與純水二相,建議用90%的乙腈及10%乙腈-水相預混合后脫氣,然后再上泵。

4在線脫氣裝置,流動相脫氣后,為了防止空氣重新溶解于流動相,在分析時,不斷在流動相中通氦氣,理論上效果是好的,只是成本比較高。

5脫好的溶液,放置時間長了,又會溶解新的氣體,需重新處理。

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