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什么級別的水可以滿足HPLC分析的要求,如何得到色譜用水?

理論上應使用超純水,但在實際操作中,應根據不同的儀器要求、具體的實際情況靈活掌握。

理想的HPLC用水應為18.2mΩ/cm的超純水,并通過0.22um的濾膜,除去熱源、有機物、無機離子及CO2等。

MS檢測器的要求最高。從實際使用的效果看,市售優質純水或蒸餾水,如果水質新鮮,再過濾完全可以滿足四極桿HPLC-MS檢測的基本要求,但易受瓶子中塑料添加劑的污染。而對于研究級的飛行時間質譜的HPLC-MS,只有新鮮的超純水才能滿足分析的要求。

近些年來逐步普及的ELSD檢測器,由于其特點,水中的顆粒將直接影響儀器的靈敏度和噪音,最好使用超純水。

對于UV和DAD檢測器,經過二次處理的各種水再過濾和脫氣基本可以滿足分析要求。如果水質好,不過濾和脫氣一般問題也不大,有時去離子水也可勉強使用。從波長來看,低波長分析用水高于高波長分析的用水,梯度分析用水高于等度分析用水,尤其在紫外較底波長時,最好使用超純水,否則極易出干擾峰,影響整個色譜圖的質量。

示差和熒光檢測器由于其靈敏度和 性,其用水比紫外要求還可以低一些。

除了從儀器的性能特點考慮外,不同使用部門,對水的要求也不盡相同,如質量監督部門應使用專門的儀器用水,有嚴格的質量保證,具有可溯源性。HPLC用水可以通過專門的純水機或超純水機來得到。按用途,超純水可以分為二個大類,儀器專用和生物培養專用,儀器用的超純水高配置的除了交換柱外,還有紫外燈和0.22um過濾頭二個可配附件。由于其交換柱、過濾頭、紫外燈是一次性消耗,成本,但質量保證,使用方便。去離子水重蒸,將去離子水經石英蒸溜或亞沸后使用,注意不能將所有水都蒸出來,蒸出3/4為宜,剩下的因離子和雜質含量高棄去,否則重蒸將行同虛設。二次或三次重蒸水,具體方法同上差不多,由于不同地區自來水初始的水質差別很大,出水率自己判斷,同時要經常清洗,質量比較難控制。采用類似家用的純水機,其采用反滲膜系統,出水率約70%,離子除去率在95%以上,水質略低于去離子水,后面加一個陰陽交換樹脂,出水可達到15mΩ/cm,過濾后水質不低于市售的純水或蒸餾水,使用方便。市場上桶裝的純凈水或蒸餾水,水在1-10mΩ/cm之間,選擇質優的產品基本可以滿足HPLC分析要求,也不一定要過濾。

有些生產單位自己有類似級別的水如注射用水、電子廠的清洗水、鍋爐蒸餾水等,過濾后可以直接使用。不管采用何種途徑,配制流動相應用新鮮水,水質越高放置時間越短。

 

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